Direct Test de Coombs

test de Coombs, également appelé le test de Coombs, est un outil diagnostique fréquemment employé qui est utilisé pour la détection de troubles immunohématologiques et immunologiques. Sur la base de la technique et les objectifs, il existe deux types de tests de Coombs: le test de Coombs direct (DAT) / test de Coombs directe (TCD), et le test de Coombs indirect (IAT). Il est impératif de mentionner que test de Coombs direct est utilisé pour détecter un type particulier de l’anémie causée par un fonctionnement anormal du système immunitaire. Le corps humain est équipé pour produire des anticorps pour identifier et attaquer les agents pathogènes étrangers. Mais dans certains cas, le système immunitaire des anticorps qui ciblent synthétisent et tuer les globules rouges (ou globules rouges dans notre corps) pour provoquer une anémie hémolytique.

Quand avez-vous besoin de prendre un test Coombs direct?

Lorsque votre médecin ne sait pas si les anticorps sont attachés à vos globules rouges, test de Coombs direct peut aider dans une telle situation. Les scénarios courants où votre médecin peut recommander test de Coombs direct comprennent: les indications post-transfusion d’anémie hémolytique et parfois les nouveau-nés diagnostiquant si la mère a développé des anticorps contre les globules rouges du fœtus et transmise à l’enfant pendant la vie intra-utérine. Si pas détectée, les chances de développer des maladies mortelles comme la maladie hémolytique du nouveau-né augmente de manière significative.

anémies hémolytiques sont généralement dues à une hyperactivation du système immunitaire qui conduit à la formation d’anticorps contre les propres globules rouges, qui est également connu comme l’anémie hémolytique auto-immune du corps. Et les symptômes peuvent contenir:

  • Difficulté à respirer
  • Le manque d’énergie et l’augmentation de sensation de fatigue
  • urine de couleur foncée et la jaunisse
  • faible nombre RBC sur les tests sanguins
  • extrémités froides, y compris mains et les pieds
  • problèmes cardiaques comme souffle cardiaque ou de l’échec, et cardiaque irrégulier

Comment le Coombs direct test est effectué?

Principe de fonctionnement DAT

Test direct de Coombs aide à détecter le revêtement d’anticorps in vivo de globules rouges (les anticorps peuvent être IgG ou un compliment ou les deux). Dans la circulation sanguine, les globules rouges ont certains antigènes qui offrent des sites de fixation aux anticorps. Tout déclencheur ou une réponse qui peut activer ces sites de fixation peuvent stimuler les symptômes de l’anémie hémolytique. Ceci est la base de HDN (maladie hémolytique du nouveau-né), l’anémie hémolytique auto-immune et la réaction de transfusion. L’activation et le revêtement peut aussi être due à certains médicaments.

Dans ce test, les globules rouges sont lavées et ensuite incubées avec du sérum humain. Cette technique permet d’obtenir des anticorps se lient aux antigènes sur RBC. Le procédé consiste ensuite à laver et l’ajout de globuline anti-humaine. Si agglutination se produit après addition d’anti-globuline humaine (parfois dénommé réactif de Coombs), il est alors le signe d’un revêtement d’anticorps sur les cellules in vivo. Il est impératif de mentionner que les deux anticorps IgG et IgM peuvent être détectés en utilisant ce test.

Techniques of DAT

  • Prendre les globules rouges du patient à partir d’un EDTA (acide éthylènediaminetétraacétique), ce qui assure l’échantillon est anticoagulé.
  • Distribuer une goutte de suspension de globules rouges (2% -5%) séparément dans chacune des 4 tubes à essai, et étiqueter les tubes 4 avec les étiquettes: Poly, contrôle, anti-IgG et anti-C3.
  • Laver les globules rouges avec une solution saline, puis incliner le tube à l’envers pour décanter la solution saline. Retirez ensuite le fond des tubes avec la solution saline gauche et répéter pendant 3 à 4 fois. Sécher les tubes avec une lingette absorbante.
  • Ajouter deux gouttes de polyspécifique AHG dans le tube « Poly », et distribuer deux gouttes de 6% de BSA au tube « Control ».
  • Secouer doucement pour mélanger le contenu dans des tubes et des globules rouges dans chaque tube formeront une pastille ou un bouton qui se faire tester pour agglutination. Enregistrer les résultats.
  • Si le réactif polyspécifique montre des résultats positifs, des tests spécifiques avec des réactifs anti-C3 anti-IgG seront nécessaires pour identifier le revêtement cellulaire, que ce soit un anticorps ou un complément, ou les deux.
  • Distribuer 2 gouttes de AHG anti-IgG dans le tube “anti-IgG”, et 2 gouttes d’AHG anti-C3 dans le tube “anti-C3”. Secouez pour mélanger le contenu.
  • Le test doit être très sensible donc nous devrons laisser incuber tous les négatifs pendant 5 minutes pour le revêtement amélioré. Pour détecter une faiblesse dans le revêtement, observer tous les négatifs au microscope.
  • Si le tube supérieur rouge a été utilisé pour la collecte de l’échantillon, alors des résultats faux positifs pourraient venir.
  • Lorsque la coagulation se produit ou il se refroidit, elle est due à la faiblesse des auto-anticorps à froid agissant notamment anti-I, la condition a lieu en complément in vitro.
  • Éviter le tube lavande-dessus pour lier les ions calcium et magnésium.
  • Évitez l’activation du complément in vitro.

10. En cas de DAT positif, obtenir les informations suivantes sur le patient:

  • Le diagnostic de certaines maladies
  • médicaments appropriés
  • Histoire de la transfusion de globules rouges et des composants de plasma
  • D’autres tests qui indiquent la destruction dans les globules rouges

Pour plus d’informations sur le DAT et IAT, regardez la vidéo ci-dessous:

Comment interpréter les résultats des tests

Nous savons que les anticorps se fixent à des globules rouges lorsque DAT est positif. L’étendue de la positivité dépend de la force de DAT et en même temps la quantité d’anticorps liés. Mais si les globules rouges sont détruits déjà, cette situation ne se rapporte pas toujours à la gravité. Dans le test de Coombs direct, les anticorps sont détectés sans identifier la cause et le type d’anémie hémolytique. Pour connaître les raisons derrière elle, les antécédents médicaux doit être observée et examen médical doit être effectué, par exemple, l’histoire de la transfusion, la réaction de la drogue, etc.

Il est important de mentionner qu’un petit segment de la population des tests positifs DAT sans éprouver ou manifester des signes d’anémie hémolytique. Si DAT est négatif, il suggère que les anticorps ne sont pas attachés à des globules rouges. Par conséquent, d’autres causes peuvent être détectées et étudiées.

Certaines situations dans lesquelles DAT est positif sont les suivants:

  • anémie hémolytique autoimmune (due à une hyperactivité du système immunitaire contre les globules rouges)
  • Développement d’anticorps sur les globules rouges, la condition est appelée « toxicité médicamenteuse ». Elle est causée par certains médicaments qui comprennent les céphalosporines, levopoda, dapsone, nitrofurantion, AINS comme l’ibuprofène
  • Lorsque le don de sang est attaqué par le système immunitaire (dans le cadre de la réaction de transfusion)
  • Les types de sang de la mère et l’enfant sont différents
  • Y compris la leucémie leucémie lymphoïde chronique
  • Un problème auto-immune appelée lupus
  • mononucléose
  • Syphilis
  • infection à mycoplasmes.

Parfois, les résultats du test de Coombs direct peut être impossible même sans aucune maladie ou le risque. En outre, le test peut être interrompu par certains médicaments et certains peuvent causer des résultats positifs sans avoir l’anémie hémolytique. Certains médicaments qui pourraient causer une anémie hémolytique sont:

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